Dra. Vera Regina Campos Viana,1 Dr. Helio M. Alves,1 MSc. Neste trabalho são apresentados dados referentes ao estabelecimento de suspensões celulares de Pothomorphe umbellata. 0,1mg.L-um BA fabricados da lâmina foliar de plantas adultas cultivadas in vivo. 0,1mg.L-1 BA foi o mais produtivo para a produção de biomassa no tempo em que a substituição da referência de carbono por 30g.L-1 sacarose propiciou maior elaboração de 4-nerolidilcatecol. Visando mobilizar a experiência biossintética das culturas empregou-se a técnica de elicitação, com glucana. Constatou-se que o tempo de incubação e a concentração do elícitor influenciaram positivamente o procedimento.
Os teores máximos detectados (862,38 mg/g PS) foram alcançados depois da incubação das culturas com setenta e cinco mg glucana/g PF por 24 h. Estes valores superaram aqueles produzidos pelas plantas intactas e pelas suspensões celulares não elicitadas. Abreviaturas: 2,4-D- ácido 2,4-diclorofenoxiacético; BA- 6-benziladenina; MS- meio Murashige & Skoog; PF- peso fresco; PIC – picloram; PS- peso seco.
Palavras clave: suspensão celular, photomorphe umbellata pariparoba, planta medicinal. Para sobreviver em sua condição sedentária, as plantas produzem metabólitos secundários que além de trazer polinizadores as protegem da ação de fatores bióticos e abióticos. Em conseqüência da variabilidade destes metabólitos (alcalóides, fenóis, flavonóides e terpenóides, dentre outros), vários autores reconhecem que tais substâncias expressam a individualidade química das espécies. Nas plantas superiores elas têm despertado a atenção por tuas atividades biológicas ou terapêuticas úteis ao homem.
Os metabólitos secundários são especialmente produzidos e extraídos a começar por plantas cultivadas no campo sofrendo, em vista disso, a intervenção de variações sazonais, pragas, doenças e condições metereológicas. Então, a utilização de técnicas biotecnológicas exibe-se como um primordial método facultativo pro cultivo das espécies, atuando como referência biológica contínua pra elaboração de fármacos.
Técnicas variadas vêm sendo utilizadas com o intuito de otimizar as condições das culturas de células vegetais, visando superar a realização dos metabólitos secundários produzidos pelas plantas matrizes. Pothomorphe umbellata, conhecida como “pariparoba”, é tradicionalmente empregada de norte a sul do Brasil, em atividade de suas propriedades colagogas, coleréticas e estomáquicas. Ocorre espontaneamente, em lugares úmidos e sombreados, da Amazônia até o sul do Brasil.
Apesar da utilização popular da espécie como agente terapêutico, são poucas os dados relacionadas com a tua constituição química e sua atividade biológica. A atividade antioxidante foi verificada em extrato etanólico de raiz, caule e folhas de pariparoba tendo sido comprovado que o 4-nerolidilcatecol foi o princípio rápido responsável por tal atividade5.
O objetivo nesse serviço foi estabelecer metodologia pra obtenção de suspensões celulares de P.umbellata e avaliar a capacidade de criação de 4-nerolidilcatecol nestas culturas. Verificou-se bem como a influência de elicitor sobre a otimização da síntese do metabólito. TABELA 1. Combinação de reguladores de progresso e fontes de carbono acrescidos ao meio MS para o estabelecimento de suspensões smartphones de P.umbellata.
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As culturas mantidas em meios com 2,4-D e picloram (PIC) foram encerradas no 30o e 32o dia de cultivo, respectivamente, sem subculturas. As condições de cultivo e a avaliação do desenvolvimento seguiram a metodologia antecipadamente mencionada. A viabilidade smartphone foi avaliada a partir do segredo do diacetato de fluoresceína (FDA). A massa smartphone usada para a definição do PS de cada cultura, e o meio líquido foram acondicionados a -20 °C para posterior análise cromatográfica.
Em face dos resultados obtidos com as suspensões smartphones mantidas no meio A11, foi instituído um experimento pra ver de perto a cinética de crescimento da cultura considerando-se o PF, PS, PF/PS e o consumo da fonte de carbono. Foram utilizados 18 frascos (125mL – 25mL de meio) com 3g de células obtidas das culturas estoque, por filtração à vácuo.
Durante um ciclo de trinta e seis dias foram coletados, a cada quatro dias, dois frascos de cultura pra aferição das variáveis estabelecidas. Visando a otimização da elaboração de biomassa, as células cultivadas em meio A2 foram transferidas para o meio A11, sendo as subculturas realizadas no 15o dia de cultivo. Para otimizar a realização de 4-nerolidilcatecol, 3g de células mantidas no meio A11 foram coletadas por filtração a vácuo, no 28o dia de cultivo, e transferidas pro meio A2.
